稻王分享常見填料的在位消毒和清洗方法

來源：http://360918818.cn/   時間：2019-06-04   

色譜填料應(yīng)用和保養(yǎng)很重要的是在位消毒和清洗,其中在位消毒可以將病原微生物的污染降低到極低水平,我們生活中常常用高溫消毒,但并不是所有的填料都能高溫消毒,例如FF系列的填料可以120℃ 20min,但是4B/6B的基球卻難以耐受高于45℃的溫度(長時間高于45℃會破壞填料).稻王分享常見填料的在位消毒和清洗方法.

通常用 0.5~1M NaOH 以合適的流速消毒 1~2 個小時，在位清洗是清除填料或柱子中的沉淀及未洗凈物質(zhì)，一般填料用 10 次后至少需要做 1 次這樣的操作，具體操作和在位消毒一樣，做在位清洗或消毒都可以互相代替，無須做兩步都做。

具體方法為：

1.離子交換，凝膠過濾，疏水色譜填料可以用 1M以 NaOH以 30cm/h反向沖洗 3~5 個柱床體積，然后再用 3~5 個柱床體積的平衡緩沖液再生即可。

2.去除疏水性強的雜質(zhì)一般方法是先用純水洗 3 個柱床體積，然后再用 70%的乙醇或 30%的異丙醇含 0.5%的 Triton 或吐溫洗 5~10個柱床體積，然后用純水洗 3~5 個柱床體積即可。對于離子交換柱子上吸附的色素可以用 0.2~0.5M 醋酸洗 3~5 個柱床體積。

3.此外也可以采用 6M 鹽酸胍洗去一些因為氫鍵而聚集的雜質(zhì)（多糖核酸等），通常也洗 5-10 個柱體積。

4.對于親和填料中的小分子的配基如 GST 瓊脂糖凝膠、IDA/NTA 瓊脂糖凝膠、賴氨酸瓊脂糖凝膠、藍(lán)色瓊脂糖凝膠、肝素瓊脂糖凝膠、苯甲脒瓊脂糖凝膠可以采用以上的方法進行位消毒和清洗。

注意：大多填料的壽命下降不是因為配基脫落，而是雜質(zhì)包裹或者吸附牢固導(dǎo)致填料可用功能基團減少而載量效率下降，因此只要處理得當(dāng)是可以延長填料的壽命的，這對降低工業(yè)用戶填料成本有很重要的意義。

大多數(shù)填料的壽命下降不是因為配給脫落，而是雜質(zhì)包裹或者吸附牢固導(dǎo)致填料可用功能集團減少而載量效率下降，因此只要處理得當(dāng)是可以延長填料的壽命的。這對工業(yè)用戶填料成本有很重要的意義。